单细胞RNA测序(scRNA-seq)Cellranger流程入门和数据质控

本文介绍了单细胞RNA测序(scRNA-seq)的数据下载、质控以及Cellranger软件的安装和功能测试。通过SRA数据下载,fastq-dump拆分,fastqc质控,以及cellranger软件的主要应用,包括mkfastq、count、aggr和reanalyze功能,帮助理解scRNA-seq的工作流程。

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单细胞RNA测序(scRNA-seq)Cellranger流程入门和数据质控

单细胞RNA测序(scRNA-seq)基础知识可查看以下文章:

单细胞RNA测序(scRNA-seq)工作流程入门

单细胞RNA测序(scRNA-seq)细胞分离与扩增

1. 单细胞RNA-seq样本数据说明

样本数据来源文章:Acquired cancer resistance to combination immunotherapy from transcriptional loss of class I HLA(由I类HLA转录丢失引起的对联合免疫疗法的获得性癌症抗性)

文章链接:https://www.nature.com/articles/s41467-018-06300-3

患者2586-4和9245-3样本Cell ranger的使用
数据GSE信息

2. 单细胞数据下载

根据上述文章可用性部分描述,文章在NCBI 的GEO数据库中编号分为为GSE117988和GSE118056。

GSE117988: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/geo/query/acc.cgi?acc=GSE117988
GSE118056:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/geo/query/acc.cgi?acc=GSE118056

下载GEO数据库SRA数据参考文章:单细胞RNA测序(scRNA-seq)SRA数据下载及fastq-dumq数据拆分

2.1 SRR_Acc_List.txt

SRR_Acc_List.txt文件内容如下:

SRR7722937
SRR7722938
SRR7722939
SRR7722940
SRR7722941
SRR7722942
SRR7692286
SRR7692287
SRR7692288
SRR7692289

2.2 SRA数据下载和fastq-dump拆分

此步骤时间漫长,需要长时间等待,可以后台运行。

# conda install -c bioconda sra-tools 

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